安捷倫液相色譜柱的聚合物基質(zhì)多為聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂,化學(xué)穩定,應用pH范圍寬,具有更強的疏水性,對蛋白質(zhì)等樣品分離效果較好;
載碳量,基質(zhì)表面鍵合相的比例,載碳量高,則保留增加,適合分析非極性化合物。鍵合相,鍵合試劑不同,對化合物的選擇性不同,一般長(cháng)鏈的烷基鍵合相(C18 C8)比短鏈的(C4 C3)穩定;非極性的鍵合相比極性的鍵合相(-NH2)穩定。
安捷倫液相色譜柱在使用中常見(jiàn)的問(wèn)題就是柱壓升高,如果柱壓是在長(cháng)時(shí)間使用過(guò)程中緩慢增加,屬于正常現象。但柱壓在使用過(guò)程中突然升高(系統管路堵塞及壓力傳感器故障除外),可能的原因有如下幾點(diǎn):
(1)色譜柱頭的過(guò)濾篩板堵塞或污染;
(2)色譜柱頭的填料被樣品污染;
(3)色譜柱內緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機溶劑,形成結晶析出;
(4)流動(dòng)相pH值過(guò)大或過(guò)小使固定相結構破壞或溶解。
解決辦法如下:
(1)如確定是色譜柱頭的過(guò)濾篩板被污染,可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力,或者卸下色譜柱頭,將其放在10%的稀硝酸內超聲清洗10分鐘,后再用純水超聲10分鐘,重新裝入色譜柱。
(2)如確定色譜柱頭的填料被污染,將柱頭螺絲卸下,挖出柱內前段被污染的填料,用相同的柱填料重新填入,仔細修復后,重新安裝上柱頭螺絲。
(3)如確定定是鹽結晶,用10%的甲醇/水沖洗色譜柱使柱內鹽全部溶解,再換高濃度甲醇。
(4)如果因pH值使用不當,很難恢復。
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